Phát hiện vi khuẩn Edwardsiella ictaluri gây bệnh trên cá tra Việt Nam bằng kỹ thuật PCR

-

Cho đến nay, một số tác giả công bố các kết quả nghiên cứu về bệnh gan thận mủ trên cá Tra và cá Basa đã kết luận rằng vi khuẩn E. ictaluri là một trong những tác nhân gây ra bệnh mủ gen ở cá Tra và cá Basa Việt Nam.

Vi khuẩn E. ictaluri (thuộc họ Enterbacteriaceae) là vi khuẩn gram âm, hình que, không sinh bào tử, yếm khí tùy tiện, phản ứng catalase dương tính, oxidase âm tính. Hiện nay, bệnh do vi khuẩn Edwardsiella đã và đang gây thiệt hại lớn cho người nuôi cá thâm canh ở các tỉnh đồng bằng sông Cửu Long. Tỷ lệ cá chết khi bị nhiễm bệnh gan thận mủ có thể lên đến 90%. Việc tăng diện tích, mức độ thâm canh cao, không có biện pháp xử lý nguồn nước ao nuôi trước khi thải ra môi trường làm lây lan nhanh mầm bệnh. Việc phát hiện sớm cá, môi trường nước bị nhiễm vi khuẩn E. ictaluri là vô cùng cần thiết để từ đó có hướng xử lý kịp thời, tránh gây thiệt hại nặng nề về kinh tế cho người nuôi trồng thủy sản.

Thông thường, vi khuẩn có thể được phát hiện bằng phương pháp nuôi cấy và xác định các đặc tính sinh hóa trong phòng thí nghiệm nhưng phải mất ít nhất 3 tuần để kết luận tác nhân gây bệnh (Panangala et ai, 2005). Đặng Thị Hoàng Oanh và Đặng Thụy Mai Thy (2009) cong bố một quy trình PCR khuếch đại một đoạn DNA 407 bp nằm trong vùng 16S rRNA để phát hiện vi khuẩn E. ictaluri. Do đó, việc phát hiện vi khuẩn này bằng kĩ thuật PCR được mô tả sau đây sẽ rất nhanh chóng và đặc hiệu, cho phép người nuôi cá có thể có hướng xử lý kịp thời khi phát hiện cá bị nhiễm khuẩn. Phản ứng khuếch đại gene (PCR) là một phương pháp cơ bản, nhanh và nhạy để phát hiện ra vi sinh vật trong mẫu bệnh phẩm cá và mẫu nước môi trường bị nhiễm mầm bệnh dựa trên việc khuếch đại gen eipl8 đặc trưng của vi khuẩn E. ictaluri bằng cặp mồi đặc hiệu.

Bài báo này đề cập đến phương pháp PCR (Polymerase Chain Reaction) khuếch đại DNA với độ đặc hiệu và độ nhạy cao được ứng dụng đề phát hiện nhanh vi khuẩn E. ictaluri. Các mồi được thiết kế đề khuếch đại đoạn gen eipl8 có kích thước khoảng 480 bp trong DNA genome của E. ictaluri. Các kết quả nhận được chỉ ra rằng kĩ thuật PCR sử dụng cặp mồi thiết kế đã khuếch đại đoạn DNA có kích thước khoảng 480 bp từ DNA genome vi khuẩn E. ictaluri, nhưng không khuếch đại đối với DNA genome của vi khuẩn E. tadar và một số tác nhân gây bệnh khác như: E. coli, Proteus, Salmonella. Kỹ thuật này có khả năng khuếch đại đoạn DNA khi mật độ E. ictaluri khoảng 3 cfu/ml. Như vậy, có thề sử dụng kĩ thuật PCR khuếch đại gen eipl8 đề phát hiện nhanh E. ictaluri.

Source: Trần Thị Thanh Huyền, Nguyễn Thị Trung, Trương Nam Hải. Tạp chí Công nghệ Sinh học 9(1): 61-65, 2011

Trieu Tuan
Trieu Tuan
Triệu Tuấn là một ông bố 2 con, tốt nghiệp Tiến sỹ chuyên ngành Công nghệ sinh học tại Nhật Bản. Hiện nay đang công tác tại Trung tâm Xúc tiến đầu tư và hỗ trợ doanh nghiệp tỉnh Cà Mau (iPEC).

Share this article

Recent posts

Popular categories

LEAVE A REPLY

Please enter your comment!
Please enter your name here

Recent comments